Анализы

Анализ предназначен для выявления и дифференциации ДНК Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica и Bordetella holmesii в биологическом материале (мазки со слизистой носо- и ротоглотки) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального времени».

Бактерии рода Bordetella были открыты бельгийским иммунологом Жюлем Борде, и название свое получили именно в его честь. Это небольшие грамотрицательные, не обладающие способностями к самостоятельному передвижению коккобациллы.

Среди бактерий этого рода есть возбудитель бронхосептикоза — бактерия Bordetella bronchiseptica, которая ответственна за заболевание кошек, кроликов, морских свинок и обычных свиней, а также собак (и его еще называют «питомниковым кашлем»). Впрочем, люди тоже могут страдать от этого заболевания, для которого характерны приступы сухого кашля, обостряющиеся перед сном.

 Bordetella pertussis вызывает хорошо известный педиатрам, да и взрослым терапевтам коклюш — болезнь, которая вызывает характерный спазматический кашель, переходящий в затяжные мучительные приступы. Приступы эти могут возникать на протяжении нескольких месяцев, доставляя человеку и окружающим немалые мучения. «Истинная» коклюшная бактерия Bordetella pertussis опасна тем, что она вырабатывает коклюшный токсин — все остальные представители этого рода, способные заражать человека, этого не делают.

Еще один представитель этого рода — Bordetella parapertussis, возбудитель паракоклюша, более легкой разновидности коклюша, которая также реже вызывает осложнения. По течению паракоклюш схож с бронхосептикозом.

Bordetella holmesii тоже не вырабатывает коклюшный токсин, но у нее есть своя особенность. Ее геном отличается от других представителей этого рода примерно на 400 уникальных генов, их нет ни у одной другой «коклюшной» бактерии. С одной стороны, это не очень много — 0,5% всей ДНК бактерии. С другой стороны, с большинством этих генов связаны ее отличия от других бордетелл.

В частности, у Bordetella holmesii есть блок генов, который кодирует несколько важных способностей бактерии:

• повышает ее устойчивость к антибиотикам,
• и активирует процессы удаления железа из внеклеточной среды.

То есть, эта бактерия более устойчива к иммунным реакциям организма

Существующие противококлюшные вакцины не работают против Bordetella holmesii.

Коклюш – высококонтагиозное заболевание дыхательных путей, вызываемое грамотрицательными аэробными коккобациллами Bordetella pertussis (B. pertussis). Бактерия Bordetella parapertussis также способна вызывать схожее по клинической картине, но более мягкое по течению заболевание респираторного тракта – паракоклюш. Заболевания встречаются во всех возрастных группах и являются наиболее опасными для маленьких детей. Несмотря на высокий уровень охвата вакцинацией (прививка АКДС), зарегистрированные случаи коклюша увеличились во многих странах и регионах за последние несколько десятилетий.

Антитела к Bordetella pertussis (B.pertussis) и Bordetella parapertussis обнаруживаются в крови через 1-2 недели после появления первых симптомов заболевания (эти сроки могут быть увеличены у новорожденных детей). Основные антигены, взаимодействующие с anti-Bordetella pertussis и anti-Bordetella parapertussis, это:

• филаментозный гемагглютинин;
• коклюшный токсин;
• белок пертактин;
• липоолигосахарид;
• фимбриальные антигены.

В ответ на инфекцию вырабатываются все классы иммуноглобулинов. Титр защитных антител постепенно снижается в течение первых трех лет после перенесенного заболевания или вакцинации.

Основной серологический метод диагностики, направленный на обнаружение специфических антител к Bordetella, – реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). При выборе РНГА в качестве диагностического теста необходимо учитывать:

• возраст пациента;
• клиническую стадию заболевания;
• наличие вакцинации в прошлом.

В результате незрелости иммунной системы новорожденных и влияния материнских антител РНГА не применяется для диагностики коклюша у младенцев. Также необходимо с осторожностью интерпретировать РНГА у пожилых пациентов и пациентов с иммуносупрессией (ВИЧ-инфекция, прием глюкокортикостероидов).

Для доказательства текущей инфекции сравнивают титр антител в парных сыворотках, полученных с промежутком в один месяц. Чувствительность РНГА не зависит от назначения антибактериальных препаратов. В отличие от большинства других методов диагностики, диагностически значимым является 50-100-процентное нарастание титра антител в парных сыворотках. Постепенное нарастание концентрации антител наблюдается при инфекции ранее не вакцинированных пациентов, и наоборот, при повторном заражении пациентов, получивших в течение предшествующих 3 лет вакцину АКДС, титр антител нарастает стремительно. Отсутствие нарастания титра в парных сыворотках также менее характерно для взрослых пациентов. В такой ситуации высокий титр антител при однократном исследовании сыворотки в сочетании с клиническими признаками коклюша может оказаться достаточным критерием для постановки диагноза.

С какой целью выполняют исследование

Исследование имеет наибольшее значение при диагностике коклюша и паракоклюша в пароксизмальной стадии заболевания.